Introduction: currently, the most relevant applications of perinatal derivatives are in wound healing, for example, the use of amniotic membrane (AM) as a biomaterials source for use in different healing processes. The anastomotic healing compromised by antimetabolic drugs, such as 5-fluorouracil (5-FU), is a potential target of AM. Objective: To evaluate the healing effects of the AM use in rats treated with 5-FU at a dose of 20 mg/kg on the 7th postoperative day, regarding the parameters percentage of type I collagen (mature), cell viability, microvascular density and granulation tissue formation. Method: Thirty-two Wistar rats were submitted to colotomy and colorraphy, separated in 4 groups with 8t rats each and received, by 7 days, different treatments intraperitoneally, once daily from the operation day until sacrifice: 1- saline solution (C), 2- 20 mg/kg 5-FU, 3- 20 mg/kg 5-FU and 4- MA, and MA. Results: Tthe treatment with 5-FU (20 mg/kg – 7 days) induced adverse effects in the anastomotic healing process evidenced by the decrease of type I collagen (mature), cell viability, percentage microvascular density, granulation tissue formation (leukocyte-fibrin crust and angio-fibroblastic proliferation). The use of AM, under these conditions, induced an improvement in type I collagen (mature) percentage. Conclusion: The treatment with 5-FU induced adverse effects on the healing anastomotic process, and the use of AM, under these conditions, induced improvement in type I (mature) collagen percentage.

Introdução: Atualmente emerge em nosso meio aplicações mais relevantes dos derivados perinatais, por exemplo, a membrana amniótica (MA), como fonte de biomateriais para emprego em diferentes processos cicatriciais. O comprometimento anastomótico por drogas antimetabólicas como o 5-fluorouracil (5-FU) é um potencial alvo da MA. Objetivo: Avaliar os efeitos cicatriciais do uso da MA em ratos tratados com 5-FU na dose de 20 mg/kg ao 7º. dia de evolução pós-operatória quanto aos parâmetros porcentagem de colágeno tipo I (maduro), viabilidade celular, densidade microvascular e formação do tecido de granulação. Método: Utilizaram-se 32 ratos da linhagem Wistar submetidos à colotomia e colorrafia separados em 4 grupos com 8 e receberam diferentes tratamentos diariamente por via intraperitoneal até o dia do sacrifício: Solução fisiológica (C), 20  mg/kg 5-FU, 20 mg/kg 5-FU e MA, MA. Resultados: O tratamento com 20 mg/kg de 5-FU, ao 7º. dia pós-operatório induziu efeitos adversos no processo cicatricial anastomótico evidenciados pela diminuição da porcentagem de colágeno tipo I (maduro), da viabilidade celular, da densidade microvascular, da formação de crosta fibrinoleucocitária e da proliferação angiofibroblástica; o uso da MA nestas condições induziu melhora da porcentagem de colágeno tipo I (maduro). Conclusão: O tratamento com 20 mg/kg de 5-FU, ao 7º. dia pós-operatório induziu efeitos adversos no processo cicatricial anastomótico e o uso da MA nestas condições induziu melhora da porcentagem de colágeno tipo I (maduro).

RESUMO Racional: A doença renal crônica atinge mais de 500 milhões de pessoas em todo o mundo. Neste contexto, as toxinas urêmicas estão relacionadas ao comprometimento da cicatrização tecidual. Objetivo: Avaliar, na cicatrização de anastomoses colônicas de ratos urêmicos indicadores séricos e anatomopatológicos que possam estar relacionados com alteração do processo de reparação tissular. Métodos: Utilizaram-se 20 ratos Wistar divididos aleatoriamente em dois grupos. No grupo simulação eles foram submetidos à simulação da nefrectomia 5/6 do rim esquerdo, simulação de nefrectomia total do rim direito, laparotomia mediana, colotomia e colorrafia. No grupo uremia, eles foram submetidos à nefrectomia 5/6 do rim esquerdo, nefrectomia total do rim direito, laparotomia mediana, colotomia e colorrafia. Coletaram-se amostras de sangue para dosagens séricas da ureia, creatinina e proteína C reativa, e do cólon para processamentos histológicos e histoquímicos na avaliação do tecido de granulação, maturação de colágeno, densidade microvascular e de miofibroblastos, viabilidade celular cicatricial. Empregou-se a histometria computadorizada para as avaliações de colágenos tipos I e III, densidade microvascular pela marcação com anticorpo monoclonal anti-CD34, viabilidade celular pela pesquisa do antígeno nuclear de proliferação celular e a densidade de miofibroblastos com anticorpo monoclonal anti-α-actina. Resultados: O grupo submetido à nefrectomia 5/6, em comparação ao grupo simulação, demonstraram aumentos da ureia sérica (p<0,0000) e proteína C reativa (p=0,0142), redução da formação de tecido de granulação (reepitelização de bordas p=0,0196, proliferação angiofibroblástica p=0,0379), porcentagens de colágeno I (p=0,0009) e colágeno III (p=0,016), densidade microvascular (p=0,0074) e miofibroblastos (p<0,0001) e antígeno nuclear de proliferação celular (p<0,0000). Conclusão: A uremia induzida pelo modelo de nefrectomia 5/6 determina impacto negativo no processo de cicatrização colônico.

ABSTRACT Background: Chronic kidney disease affects more than 500 million people worldwide. In this context, the uremic toxins present are related to worsening in tissue healing. Aim: Evaluate on healing of colonic anastomosis in uremic rats, serum and anatomopathological indicators, which may be related to the change tissue repair process. Methods: Twenty Wistar rats, were randomly separated into two groups. In the sham group they were submitted to 5/6 nephrectomy simulation in left kidney, simulation right nephrectomy, median laparotomy, colotomy and colorraphy. In the uremia group, they were submitted to 5/6 nephrectomy of the left kidney, total nephrectomy of the right kidney and median laparotomy, colotomy and colorraphy. Were collected for serum urea, creatinine and CRP dosages and the colonic segments were studied for evaluation of granulation tissue, collagen maturation, microvascular and myofibroblasts density, and cell viability. Through histochemical processing, microvascular density was evaluated by anti-CD34 monoclonal antibody marking, cell viability by cell proliferation nuclear antigen screening and myofibroblasts density with monoclonal anti-α-actin antibody. Computerized histometry was used for evaluations of collagens type I and III by the coloration of picrosirius. Results: The group submitted to nephrectomy 5/6, compared to the sham group, show urea increase (p<0.0000) and higher C reactive protein (p=0.0142). Decrease of granulation tissue formation (border reepithelialization p=0,0196, angiofibroblast proliferation p=0.0379), mean collagen I (p=0,0009) and collagen III (p=0,016), microvascular density (p=0,0074), cell proliferation nuclear antigen (p<0,0000) and myofibroblasts (p<0,0001). Conclusion: The uremia induced by nephrectomy 5/6 model establishes negative impact in the colonic wound healing.

OBJETIVO: Avaliar se o tratamento com L-arginina influencia a cicatrização de retalhos cutâneos em ratos expostos à nicotina. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos Wistar pesando 142,4±10,1g separados em quatro grupos: GC- tratamento com solução tampão fosfatos pH 7,4, confecção de retalho cutâneo, observação por 10 dias; GN- exposição à nicotina por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, observação por dez dias; GA- tratamento com solução tampão fosfatos pH 7,4 por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, tratamento com arginina por dez dias; GAN- exposição à nicotina por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, tratamento com arginina por dez dias. Foram avaliadas as áreas de necrose, re-epitelização, reação inflamatória e formação de tecido de granulação, pela coloração HE, a área de deposição total e a diferenciação de colágenos I e III por histometria com a coloração de picrosirius, e, através da marcação imunoistoquímica com anticorpo monoclonal anti-CD34, a densidade vascular cicatricial. RESULTADOS: As porcentagens de áreas de necrose de GN e GNA foram maiores (p<0,001) do que GC e GA. Nos escores histológicos, a deposição de colágeno e a porcentagem de colágeno tipo I, no GC e GA foram similares (p>0,05) e maiores (p<0,001) do que em GA e em GNA e, nas densidades vasculares, GN e GAN foram menores (p<0,001) do que em GC e em GA. CONCLUSÃO: A exposição à nicotina inibiu os efeitos da arginina, e nos ratos não expostos, induziu melhora na angiogênese e na deposição de colágeno total nos retalhos cutâneos.

OBJECTIVE: To evaluate whether treatment with L-arginine influences the healing of skin flaps in rats exposed to nicotine. METHODS: 40 male Wistar rats weighing 142.4 ± 10.1 g were separated into four groups: GC: treatment with 7.4 pH phosphate buffer, submitted to skin flap and observation for ten days; GN: exposure to nicotine for four weeks, submitted to skin flap and observation for ten days; GA: treatment with 7.4 pH phosphate buffer for four weeks, submitted to skin flap and arginine treatment for ten days; GAN: exposure to nicotine for four weeks, submitted to skin flap and treatment with arginine for ten days. We evaluated: areas of necrosis, re-epithelialization, inflammatory reaction and formation of granulation tissue by HE stain; the total area of deposition and differentiation of collagens I and III by histometry with picrosirius staining; and the scar vascular density by immunohistochemical staining with monoclonal anti-CD34 antibodies. RESULTS: The percentages of necrotic areas in GN and GNA were higher (p <0.001) than in GC and GA. In histological scores, collagen deposition, and the percentage of type I collagen, GA and GC were similar to each other (p> 0.05), but higher (p <0.001) than GA and GNA; as for vascular densities, they were lower in GN and GAN (p <0.001) than in GC and GA. CONCLUSION: Exposure to nicotine inhibited the effects of arginine and in unexposed mice there was induction of angiogenesis and improvement in the total collagen deposition in the skin flaps.

OBJETIVO: verificar se o tacrolimus administrado em ratos, em vigência de pancreatite induzida pela L-Arginina, interfere nos níveis séricos da amilase e glicose e no padrão histológico do parênquima pancreático. MÉTODOS: quarenta ratos Wistar foram distribuídos em quatro grupos com 10 ratos cada. Grupo controle (C), grupo tacrolimus (T), grupo pancreatite (P) e grupo pancreatite-tacrolimus (PT). Foram avaliados os níveis séricos de amilase, glicose e tacrolimus e feitas avaliações histológicas do pâncreas, A indução de pancreatite foi feita pela inoculação de L-Arginina na dose de 500mg/100g de peso corporal por via intraperitoneal e o tratamento com tacrolimus na dose de 1ìg/kg por via subcutânea durante quatro dias. RESULTADOS: a amilasemia estava mais elevada (p=0,0000) nos grupos PT, T e P do que no grupo controle. A média do grupo PT foi maior (p=0,0009) que a do grupo T, mas não diferiu (p=0,6802) da média do grupo P. Entre os grupos P e T não houve diferença (p=0,2568). Não houve diferença nas médias de glicemia entre os grupos (p=0,4920) e os níveis séricos de tacrolimus foram similares nos grupos PT e T (p=0,7112). Não ocorreram alterações histológicas nos grupos T e C e não ocorreu hemorragia no pâncreas dos ratos dos grupos P e PT. No grupo P, em 30% não se observou edema, em 20% observou-se a forma leve e em 50%, a moderada; quanto à infiltração inflamatória, em 80% moderada e em 20% não ocorreu, e a atrofia do parênquima foi de 60% moderada e 40% acentuada. No grupo PT, houve ocorrência de edema, infiltração inflamatória e atrofia do pâncreas em todos os ratos. CONCLUSÃO: o tratamento pelo tacrolimus induziu aumento nos níveis séricos de amilase em ratos normais, não alterou a glicemia nem o padrão histológico do parênquima pancreático. Na vigência de pancreatite induzida pela L-Arginina o tacrolimus induziu edema, infiltração inflamatória e atrofia com maior gravidade no parênquima pancreático.

OBJECTIVE: To determine whether tacrolimus administered to rats, in the presence of pancreatitis induced by L-Arginine, interferes with the serum levels of amylase and glucose and the histological pattern of the pancreatic parenchyma. METHODS: Forty Wistar rats were divided into four groups with 10 rats each: control group (C), tacrolimus group (T), pancreatitis group (P) and pancreatitis-tacrolimus group (PT). We evaluated serum levels of amylase, glucose, and tacrolimus and made histological assessments of the pancreas. Induction of pancreatitis was made by inoculation of L-Arginine at a dose of 500mg/100g body weight intraperitoneally, and tacrolimus treatment at a dose of 1ìg/kg subcutaneously for four days. RESULTS: Serum amylase was higher (p = 0.0000) in groups PT, P and T than in the control group. The PT group mean was higher (p = 0.0009) than in the T group, but did not differ (p = 0.6802) from the average of the P group. There was no difference between groups P and T (p = 0.2568). Neither in mean blood glucose between the groups (p = 0.4920); serum levels of tacrolimus were similar in PT and T groups (p = 0.7112). There were no histological changes in groups T and C and no hemorrhage in the pancreas of rats in groups P and PT. In group P, there was no edema in 30%, mild edema in 20% and in 50%, moderate; as for inflammatory infiltration, it was moderate in 80% and absent in 20%, and atrophy of the parenchyma was moderate in 60% and severe in 40%. In the PT group, there was edema, inflammatory infiltration or atrophy in the pancreas in all rats. CONCLUSION: Treatment with Tacrolimus induced an increase in serum amylase in normal mice, but did not affect blood glucose or the histological pattern of the pancreatic parenchyma. In the presence of pancreatitis induced by L-Arginine tacrolimus induced edema, inflammatory infiltration and more severe atrophy in the pancreatic parenchyma.

RACIONAL: A videocirurgia pode apresentar complicações inerentes ao método e dentre elas destacam-se as relacionadas ao aumento da pressão na cavidade intra-abdominal. OBJETIVO: Analisar os efeitos do pneumoperitônio em modelo experimental de endotoxemia causada por lipopolissacarídeo. MÉTODO: Foram utilizados 32 ratos Wistar dos quais foi coletado sangue 24 horas prévias para obtenção dos valores de referência nas provas de função renal, hepática e do estado endotóxico (contagens total e diferencial de leucócitos, contagem de plaquetas e dosagens de lipopolissacarídeo, TNFα, IL6). A seguir os ratos foram separados em quatro grupos com oito: grupos controle inoculados com lipopolissacarídeo (10 mg/kg via intraperitoneal) e mantidos por quatro e 11 horas (C-LPS4 e C-LPS11). Grupo C-PP, submetido ao pneumoperitônio por CO2 por uma hora e mantido sob observação por seis horas. Grupo experimento (E) inoculados com 10 mg/kg de lipopolissacarídeo por via intraperitoneal, após quatro horas submetidos ao pneumoperitônio por CO2 por uma hora e mantidos sob observação por seis horas. Ao término destes períodos foram coletadas amostras de sangue para as mesmas avaliações iniciais. Utilizou-se o método de T-Student para as comparações dos resultados, com nível de significância de 0,05. RESULTADOS: Em comparação aos valores iniciais e aos grupos controle, o grupo E apresentou maiores valores nas dosagens de creatinina e uréia, bilirrubina direta, ALT e TAP, aumento nas dosagens de IL6, TNFα e diminuição de plaquetas, aumento de leucócitos e bastonetes e detecção de endotoxina circulante. CONCLUSÃO: O pneumoperitônio por dióxido de carbono induz aumentos na liberação de TNFα, IL6, piora das funções hepática e renal em modelo experimental de endotoxemia induzida por lipopolissacarídeo.

BACKGROUND: Videosurgery can bring complications with it´s manipulation and among them the hyperpression into the abdominal cavity is important factor. AIM: To analyze the pneumoperitoneum effects in an endotoxemia experimental model caused by lipopolyssacharide. METHOD: Thirty-two Wistar rats were utilized, from which blood was collected 24 hours prior to the experiment for the initial evaluations of the renal function, the hepatic function and the endotoxic state (total counts and differential of leukocytes, platelet count and dosages of lipopolyssacharide, TNFα, IL6). The rats were then separated into four groups of eight: control groups inoculated with lipopolyssacharide (10 mg/kg via intraperitoneum) and kept for four and 11 hours (C-LPS4 and C-LPS11). Group C-PP, control of pneumoperitoneum by carbon dioxide at 10 mmHg for one hour and kept under observation for six hours. Experiment group (E) in which the rats were inoculated with 10 mg/kg of lipopolyssacharide via intraperitoneum and after four hours were submitted to pneumoperitoneum by carbon dioxide at 10 mmHg for one hour and kept under observation for six hours. At the end of these periods, blood samples were collected for the same initial evaluations. The T-student method was utilized for statistical comparisons of results, with a significance level of 0.05. RESULTS: Compared to the initial values and the control groups, Group E had higher values in the renal function tests (creatinine=0.85 ± 0.24 and urea=106.38 ± 37.61 mg/dL). In the hepatic function tests, there were higher values in the dosages of direct bilirubin (0.34 ± 0.09mg/dL), ALT (390,38 ± 351.88) and TAP (17.01 ± 2.18). The endotoxic state was confirmed by the dosages of IL6 (36.0 ± 11.23 pg/mL), TNFα (518.36 ± 203.39 pg/mL) and by the hematological alterations: reduction of platelets, increased leukocytes and band neutrophils and the detection of circulating endotoxin (0.21 ± 0.08 UE/mL). CONCLUSION: Pneumoperitoneum by carbon dioxide induces increase of TNFα, IL6, worsens the hepatic and renal function in the experimental endotoxemia model induced by lipopolyssacharide.